一、生物芯片的概念
生物芯片(biochip)是近几年生命科学研究领域中崭露头角的一项新技术,它是指在固相基质上集成各种可以作为受体的生物信息,包括寡核苷酸、蛋白质/酶、抗原/抗体、细胞等,利用受体与连接物间的反应来进行生物学的检测。目前生物芯片实用的载体大致有一下类型:NC膜、玻璃、塑料、金箔、硅片、人工合成的软性硅胶等。
二、选取玻璃基质做蛋白芯片的优势
生物芯片最早开始起源时就是用玻璃来试验的,尤其基因芯片、人类全基因组芯片及SNP类研究芯片,都是以玻璃为基质的。在蛋白质芯片的研究中,国内外使用玻璃基质的却很少。基因可以非常牢固地结合在玻璃上,经过简单的处理即可进行保存。也不影响效期。而蛋白质就不同了,在玻璃上结合,需要很多处理步骤,也需要三维立体的空间才能保存蛋白质,因此,蛋白质是有高活性的,首先需要化学结合在玻璃上,另外需要保持活性不变。
我公司之所以在玻璃上做蛋白质芯片,是因为突破了蛋白质在玻璃上的化学结合和长期保存活性这两道关。现在能够最长保存一年半以上。这是大多数人无法用玻璃来做蛋白质芯片的原因。另外,玻璃基质的好处在于,其能够自动化。是透明的,容易测定发光、荧光、还有显色。可以透射测定,这使其灵敏度就大大提高,线性范围也明显扩大了。还有,样本在玻璃表面点样效率高,起浓缩作用。
三、不孕不育联检芯片的反应原理
应用蛋白质化学技术将高度纯化的精子抗原、心磷脂抗原、子宫内膜抗原、卵巢抗原和HCG抗原、滋养层细胞抗原、透明带抗原按特定图案设计,固定于活化后的玻璃基质上作为载体,加入患者血清后,血清中抗体与片基上的抗原结合,再加入示踪物,在底物的作用下形成按点样设计而形成的图形,一次实验即可检测出七种不孕不育患者自身抗体的血清状况。
四、不孕不育联检芯片的临床意义
1、抗精子抗体(AsAb)临床意义
正常情况下,女性的血液中是没有AsAb的。女性生殖道有一系列酶,它们能降解精子的抗原性,使其不能刺激免疫系统发生免疫反应。当这种酶系统缺陷或生殖道被破损时,可使进入的精子保持抗原性,刺激机体产生AsAb。血清中ASA抗体以IgG、IgM型为主。生殖道分泌物液中以IgA为主,亦可见IgG和IgE。不孕者血清中ASA抗体阳性率在10%~30%,阻塞性无精症患者ASA阳性率可达60%左右。10%~30%不明原因女性不孕症患者也与ASA抗体产生有关。
2、抗子宫内膜抗体(AEA)临床意义
抗子宫内膜抗体的检测是子宫内膜异位症和继发性不孕症患者诊断及疗效观察的有效指标。子宫内膜异位症是一种妇科常见病,发病率为4-17%,可导致高达30-40%的不孕症。许多学者报告在多例子宫内膜异位症患者血液中检测到了抗子宫内膜抗体。患者经治疗后,血清中抗子宫内膜抗体浓度明显降低。
3、抗心磷脂抗体(ACA)临床意义
用于定性检测习惯性流产等不育症患者血清中存在的IgG型抗心磷脂抗体(ACA),一种自身免疫性抗体,其对不孕不育症患者病因的诊断和鉴别诊断具有重要的辅助诊断意义。研究发现ACA与习惯性流产等疾病密切相关。约70%未经治疗的ACA阳性患者可发生自发性流产和宫内死胎。ACA抗体可分为IgG、IgM和IgA型,以IgG型最为常见,IgM型次之,IgA型APL抗体与自身免疫性疾病的关系较小。
4、抗卵巢抗体(AOA)临床意义
AOA阳性见于卵巢早衰,在不育和流产患者中,AOA阳性率(42%-52%)显著高于健康孕妇的阳性率(3.2%),由于卵巢损伤、感染、炎症等原因造成卵巢抗原的外溢,在免疫功能存在某种紊乱的个体,诱导产生AOA,AOA会进一步加重卵巢的损伤,并导致子宫、胎盘的功能不健全,引起不孕和流产。
5、抗滋养层细胞膜抗体(Ta)临床意义
在于合体滋养层浆膜上有可被母体识别的抗原系统,它们的存在影响着孕妇与胎儿之间的免疫平衡,研究表明在不明原因流产的妇女血清中,抗滋养层细胞膜抗体比正常孕妇明显增高,抗体的增高与流产之间有着密切联系。其机制可能与封闭抗体的减少有关。
6、抗透明带抗体(ZP)临床意义
透明带是围绕在卵细胞周围的一层嗜酸性糖蛋白,具有很强的免疫原性。集体免疫异常所产生的抗透明带抗体与透明带特异性结合后,可干扰精子对卵子的穿透,致使卵细胞受精障碍,是妇女不孕的原因之一。
7、人绒毛膜促性腺激素(HCG)临床意义
人绒毛膜促性腺激素(HCG)是维持早期妊娠的主要激素,其主要功能是维持妊娠黄体。此外,HCG还可防止胎儿滋养细胞被母体血液中的抗体及免疫活性细胞识别而被排斥,故对胎儿有免疫保护作用。母体淋巴细胞的排斥反应主要是通过抑制HCG抗体来实现的,若这种抑制被减弱,导致抗体含量增加,则这种保护作用将受到破坏,从而引起不育。
综上所述:传统的检测方法一次检测都只能识别一种蛋白,而深圳赛尔生物的不孕不育症自身抗体联检芯片试剂盒,同时检测7种不孕抗体,具有省时、高效、高通量平行检测的优点。是现代免疫学技术和蛋白质化学技术的结晶。检测结果既可肉眼定性观察,也可配置阅读仪定量检测,结果可长期保存,是传统检测方法无可比拟的。
四、开展不孕不育症自身抗体联合检测的必要性
不孕不育的原因有排卵障碍、精液异常、输卵管异常、不明原因的不孕、子宫内膜异位症,免疫学不孕等。生殖道异常免疫学因素的参与和某些患者的发病有密切的关系。在男性和女性患者都有可能出现的抗精子抗体,对精子有制动和细胞毒的作用。在女性出现的抗透明带抗体,可阻止精子对卵细胞的附着和穿透,抗子宫内膜抗体则可阻止受精卵的着床,检测这些自身抗体对免疫不育症的诊断有十分重要的临床价值。不孕不育并不是一个单一疾病,而是多种疾病的综合临床表现,很多因素都可以造成男女不孕不育,有40%的男性出现问题会导致不孕不育,有50%的女性出现问题会导致不孕不育,另有10%为不明原因造成的不孕不育。
全球不孕不育夫妇已达-万对,在中国不孕不育症也日渐高发,据统计每八对夫妻中就有一对不孕不育夫妇。所以,在当今生活中,不孕不育的检测是每一个家庭必要的检测项目。告别不孕不育,让爱更完美!不孕不育医院生殖医学中心、各大妇幼保健院、第三方检验机构、各医院的婚前检查等。
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